使用這些室溫DNA存儲解決方案釋放您的冰箱

這是一個與分子生物學本身一樣古老的格言：你不會將DNA存儲在工作臺上。DNA通常在-20°C，-80°C甚**液氮中冷凍保存，需要大量資金和經常性成本以及空間 - 更不用說冷凍機停機時的瘋狂爭奪。類似地，用冷卻塊或干冰運輸冷凍DNA是昂貴的，可能需要特殊的文書工作和處理，并且如果有延遲則存在腐敗的風險。

但是有一種更溫暖，更簡單的替代方案：用于在室溫下儲存和運輸DNA的系統。在這里，我們探索您的選擇

膜

Guelph大學安大略省生物多樣性研究所的**DNA科學家Natalia Ivanova指出，保存DNA而不凍結的一種方法是將其與某種纖維材料結合  。

例如，Whatman FTA卡采用涂層纖維素膜，DNA將纏繞在其中。起始樣品可以與血液，細菌培養物或純化的DNA一樣多樣化，化學涂層將溶解細胞并保護樣品DNA免受核酸酶和氧化，紫外線和微生物降解。根據現在擁有Whatman的GE Healthcare Life Sciences 的  產品文獻（PDF），“室溫下儲存在FTA卡上的基因組DNA數據顯示，血液樣本的DNA穩定性超過20年。”

但伊萬諾娃警告稱，“洗脫DNA并不容易”，需要一系列基于實驗室的洗滌來清除污染物; 相反，沖頭通常取自FTA卡并直接用于下游應用，例如PCR。

IntegenX的  GenPlates是每個孔中含有6mm FTA圓盤的微量滴定板; 它們具有各種配置，例如三個96孔區域，六個40阱區域和12個16阱區域。將樣品加入孔中并干燥后，用粘合劑蓋密封板以便儲存或運輸。GenPlates可與市售液體處理器一起使用，以幫助實現自動化。

其他產品，如Macherey-Nagel的NucleoCard®，可以類似地用于裂解細胞和結合DNA。

Whatman**近推出了新系列的FTA Elute卡。在這里，與DNA保持與基質結合的標準FTA卡形成對比，“FTA Elute的化學成分允許蛋白質[例如，來自裂解細胞]保持與卡片基質緊密結合，” 產品說小冊子（PDF），“快速簡便的洗脫步驟，包括水和熱，以獲得純化的單鏈DNA溶液。”

玻璃

鹽水蝦和緩步動物等無水生物  可以通過保存其玻璃質形式的DNA和其他生物分子（基本上是收縮包裹它們）而在長達一個世紀的干旱中存活。在存在高濃度的二糖（例如海藻糖）的情況下，生物體能夠通過氫鍵可逆地穩定這些極性分子。

海藻糖和聚合物聚乙烯醇（PVA）已成功用于法醫學和其他實驗室科學中的核酸冷凍保存。伊萬諾娃和瑪莎Kuzmina測試的這些DIY版本，和市售合成Biomatrica  DNAstable®產品，為他們的相對能力保護DNA四年[1]。他們發現DNAStable板上的存儲在室溫和56°C（模擬加速老化）提供了比DIY解決方案更好的保護，但所有這些都足夠穩定用于運輸目的。

Biomatrica的DNAStable有多種形式，包括在管中加入干燥的DNA和加入DNA的96孔和384孔板，以及液體（DNAStable LD），可以添加到客戶選擇的實驗室器具中的樣品中。將樣品在層流罩下或使用真空濃縮器干燥。Biomatrica營銷**Michael Vengrow指出，不需要特殊設備來存放樣品。“但是，為了謹慎起見，我們為產品提供保濕袋和一些干燥劑。”

IntegenX提供與Qiagen及其QIAsafe（2013年底停產）類似的產品GenTegra DNA。對于DNAStable和GenTegra DNA，回收僅涉及重建樣品，通常在水中。補液后不需要進行凈化或純化，**成分顯然不會影響下游應用，如PCR，測序和微陣列，UCSF的Eunice Wan及其同事在2009年的一份出版物中寫道[2]。然而，它們確實改變了A230 / 280的比例，可能是因為產品本身優先在230nm處吸收。

Biomatrica**近推出了一種新產品DNAStable Plus，它可以使樣品在使用或干燥之前穩定并以液體形式儲存長達六個月，Vengrow指出。該公司還提供專為RNA配制的產品。

采樣

已知冷凍/解凍循環對DNA完整性具有有害影響，并且通常鼓勵研究人員通過以等分試樣制備樣品來**小化凍/融。

在室溫下干燥存儲在Whatman卡片上的DNA可以通過每次從卡上刷新來“重復使用”。類似地，可以對來自GenPlates的單個孔進行取樣而不會干擾其他孔。

在化學保存的DNA的情況下，“你可以做多次水合/脫水。我們為每種協議中有多少提供了建議，“Vengrow說。以等分試樣存儲干燥的DNA可以緩解這個問題，但是，Ivanova警告說，稀釋的樣品不能承受多次水合/脫水以及更濃縮的樣品。

底線

對于擁有過度擁擠的冰柜或博士后樣品檔案的實驗室來說，室溫儲存系統似乎是一種受歡迎的緩解措施。但Ivanova不建議您將所有現有樣品移**室溫儲存。數據并非完整。“對于真正的長期存儲，我仍然會選擇-80 [°C]，”她說。但對于沒有這種冰箱的實驗室來說，“在干燥條件下儲存DNA可以在-20°C [℃]儲存時增加額外的安全性。”

參考

[1] Ivanova，NV，Kuzmina，ML，“室溫下干燥DNA儲存和運輸的協議”，Molecular Ecology Resources，13：890-8,2013。[PubMed ID：23789643 ]

[2] Wan，E，et al。，“Green technologies for room temperature nucleic acid storage，”Curr Issues Mol Biol，12：135-42,2009。[PubMed ID：19801719 ]